梅毒的实验室检查方法

以往的实验室检查包括梅毒螺旋体检查、梅毒血清检查和脑脊液检查。随着基因诊断技术的发展，PCR技术的应用检测梅毒螺旋体DNA，使梅毒的诊断准确、快速、敏感。 一、梅毒螺旋体检查 (一)检查方法 1．暗视觉显微镜检查：在皮肤损伤处，用玻璃刮去组织渗出物或淋巴结穿刺液，看到活动的梅毒螺旋体。 2．绿色梅毒螺旋体在荧光显微镜下可见。 3．用银染色法检查梅毒螺旋体的活体组织（warthin-starry）梅毒螺旋体是深棕色的，有螺旋结构，位于真皮毛细血管周围，可以通过levoaditis或荧光抗体染色找到。银染色的阳性结果需要仔细解释，因为其他类似梅毒螺旋体的物质很容易混淆。而且特异性荧光检查更可靠。 (二)螺旋体识别 镜下检查梅毒螺旋体与雅司、地方梅毒、品他三种非性病螺旋体的鉴别，同时也应与齿大螺旋体、齿小螺旋体、软螺旋体、生殖器螺旋体进行鉴别。 1．雅司、地方梅毒、品他三种非性病螺旋体：形态上不能与梅毒螺旋体不同，但可以识别流行病学、病史和临床表现； 2．齿大螺旋体：为疏螺旋体，比梅毒螺旋体长，存在于口腔中，尤其是在齿缝中； 3．齿小螺旋体：比梅毒螺旋体短，旋距短，运动不规则，两端略宽于中间。主要见于齿垢； 4．软螺旋体：为疏螺旋体，螺旋少，运动不规律快，常不断改变其形态。寄生于皮肤溃疡。 5．生殖器螺旋体：比梅毒螺旋体短，螺旋体大而不规则，生于阴垢内，不经常清洗的检出率较高。 6．其他:识别螺旋状物体，如螺旋网状纤维、纤维蛋白细丝、纤毛、串状红细胞等。 二、梅毒血清试验 梅毒血清试验根据抗原的不同，分为以下两类： (一)非梅毒螺旋体抗原血清试验，以心磷脂为抗原，在血清中测量抗心磷脂抗体，又称反应素。本试验敏感性高，特异性低，易发生生物假阳性。早期梅毒患者经过充分治疗后，反应素可以消失，早期未经治疗的患者可以减少或消失部分患者的反应素。目前一般用作筛选和定量试验，观察、复发和再感染。 1．性病研究实验室试验（venerealdiseaseresearchlaboratorytest，vdrl）；以心磷脂、卵磷脂和胆为抗原，可进行定量和定性试验，试剂和对比血清已标准化，成本低。该方法常用，操作简单，需要用显微镜读取结果，缺点是一期梅毒敏感性低。 2．快速血浆反应素试验（rapidplasmareagintest，rpr）：对vdrl抗原进行了改进，其敏感性和特异性与vdrl相似，其优点是可以用肉眼读取结果。 3．不加热血清反应素玻片试验（unheatedserumreaginusr）vdrl抗原也得到了改进，其敏感性和特异性与vdrl相似。 (二)梅毒螺旋体抗原血清试验:用活的或死的梅毒螺旋体或其成分作为抗原来确定抗螺旋体抗体。该试验具有较高的敏感性和特异性，通常用作证实试验。该试验是检测血清中抗梅毒螺旋体igg抗体。即使患者得到足够的治疗，它仍然可以存在很长一段时间，甚至终身不会消失，血清反应仍然是阳性的。因此，不能用于观察。 1．荧光梅毒螺旋抗体吸收试验（fta-abstest）：该方法是一种更敏感、更特殊的螺旋体试验。 2．梅毒螺旋体血凝试验（tpha）：敏感性和特异性都很高，操作简单，但对一期梅毒不如fta-abs试验敏感。 3．梅毒螺旋体制动试验（treponemapallidumimmobilization，tpi）；在用nichol株螺旋体(活的)加入患者血清(含抗体)后，可以在补体的参与下抑制螺旋体的活动。如≥梅毒螺旋体停止活动的50%为阳性。本试验具有较高的特异性和敏感性，但设备要求高，操作困难，仅用于研究。 三、梅毒螺旋体基因诊断技术检测 梅毒螺旋体不能在体外培养。在临床标本中检测梅毒螺旋体最敏感、最可靠的方法是兔感染试验（rit），Rit可以证明活梅毒螺旋体的存在，是检测梅毒螺旋体的常用标准方法。然而，利用rit对新生儿或成人梅毒进行常规诊断是不现实的。梅毒血清学的诊断对确定感染和治疗具有重要意义，但对早期梅毒的诊断不敏感，对先天性和神经性梅毒的诊断也不特殊。血清学试验被用作先天性梅毒的辅助诊断。主要问题是将无症状感染婴儿与非感染婴儿区分开来。这些婴儿的母亲梅毒血清试验呈阳性。困难在于母亲的体液免疫反应不能与婴儿的抗体反应不同，因为母亲的igg可以传递给胎儿。另外，由于igg终身存在，治疗结果很难评估。假阳性常存在于血清学诊断中。