白细胞介素6在早产胎膜早破孕妇血清及胎膜组织中的表达

目的是探讨白细胞介素6(il-6)早产胎膜早破孕妇血清水平及其在胎膜组织中的表达与早产胎膜早破的关系。该方法采用酶联免疫吸附法和免疫组化法，检测30例早产胎膜早破孕妇(14例为早产1组，即中重度绒毛膜羊膜炎患者；16例为早产2组，即无中重度绒毛膜羊膜炎患者)和20例正常孕妇(对照组)血清中的il-6水平和胎膜组织中的il-6蛋白表达。结果早产1组孕妇血清中il-6的水平明显高于其他两组，差异极为显著(p＜0.01)；早产1组、早产2组、对照组il-6分别为155.17 ng/l、79.11 ng/l及70.15 ng/l。在早产两组胎膜组织中，绒毛膜羊膜炎患者在绒毛膜层中有较多的il-6蛋白表达，在侵入绒毛膜的炎性细胞浆中，il-6.表达更明显。结论il-6与感染引起的早产有关。

虽然早产的发病率只有5%～15%，但对母婴影响严重。目前尚不清楚早产的确切原因。近年来，有人提出炎性细胞因子与早产有关。羊水中的炎性细胞因子，如白细胞介素6(interleukin-6， il-6)对亚临床感染引起的早产进行检测，国外报道较多［1，2］。本研究探讨了il-6与早产胎膜早破的关系，为早产的临床诊断和治疗提供了依据，通过检测早产胎膜早破孕妇血清中il-6水平和胎膜组织中il-6蛋白的定位表达。

材料与方法

一、研究对象

1.病例选择：选择1996年10月至1997年9月，根据胎膜组织病理检查结果，分为早产1组，即中重度绒毛膜羊膜炎，14例；早产2组，即无中重度绒毛膜羊膜炎，16例。两组无临床感染症状，妊娠32～37 6周间分娩。另选择妊娠32～37 6周内，我院产前门诊检查员20例为对照组。所有孕妇均无产科及内外合并症。

2.胎盘绒毛膜羊膜炎的诊断标准［3］：在绒毛膜和羊膜组织中，中性粒细胞每高倍浸润视野5倍～10个为轻度；11～30个为中度；＞30个为重度。

二、方法

1.标本采集:(1)孕妇血清标本采集:所有孕妇取血时无宫缩。肘部静脉血4 ml，分离血清，-20℃冰箱保存待测。(2)胎膜标本采集:胎盘分娩后，取出胎膜破口5 超过cm的胎膜组织2 cm×3 cm×0.5 cm，用10％待病理学和免疫组织化学检测，甲醛固定，常规石蜡包埋，室温保存。

2.检测方法:(1)血清中il-6的检测:il-6试剂盒由北京邦定公司提供，采用酶联免疫吸附试验，在酶联免疫测定仪上测量410 吸光度值为nm，绘制标准曲线，计算il-6水平。(2)胎膜组织il-6蛋白检测:免疫组化(abc)方法。i抗为鼠抗il-6单克隆抗体(系邦定公司产品)；ⅱ抗生物化兔抗鼠igg；ⅲ链霉蛋白素(北京中山生物技术有限公司产品)是抗辣根酶标记的。按照abc免疫组化试剂盒的说明书进行主要步骤。结果判断：光镜下细胞浆中有棕黄色颗粒，即il-6蛋白表达。

三、统计分析

血清中的il-6为偏态分布，取自然对数使其呈正态分布后进行统计±s表示。使用单因素方差分析，使用spsss windows 6.0统计软件包进行统计。

结果

每组孕妇血清中的il-6水平

早产1组孕妇血清中的il-6水平明显高于早产2组和对照组，差异极为显著(p＜0.01)后两组比较，差异不显著(p＞0.05)。见表1。

表13组孕妇血清中il-6的水平比较

155.17±62.00*绮？1679.11±17.96对照组2070.15±14.62

*与早产2组和对照组相比，p＜0.01

二是胎膜组织中il-6蛋白的表达

在早产2组胎膜组织中，羊膜细胞浆中有il-6蛋白，绒毛膜层中只有散落的棕黄色颗粒。在早产1组胎膜组织中，il-除羊膜细胞浆中的表达外，6蛋白在绒毛膜层中也有明显的表达，特别是在侵入绒毛膜的炎性细胞浆中，il-6.蛋白质表达更为明显。对比两组，差异显著。(p＜0.05)。

讨论

Il-6级血清与早产的关系

细胞因子是由激活的免疫细胞和间质细胞合成的一组相关糖蛋白，主要由感染或免疫反应引起。蜕膜富含巨噬细胞，是人类妊娠组织中各种细胞因子合成的主要来源，羊膜绒毛膜也被认为是炎症细胞因子产生的地方。il-是一种炎性细胞因子。在正常妊娠期间，生殖器官局部组织细胞产生适量的il-6，对胎儿的生长发育和足月分娩有一定的影响。如果il-6产生过多，并进入母体循环，则会导致病理状况。本研究发现，绒毛膜羊膜炎引起早产，母血il-6水平升高，与greiy等［4］olllesezezuk等等［5］报告结果一致。

二、胎膜组织il-6蛋白表达与早产的关系

menon等［6］应用免疫组化研究发现，羊膜和绒毛膜组织在感染或内毒素刺激后都有il-6蛋白表达。本研究采用免疫组化方法检测早产绒毛膜羊膜炎胎膜组织的il-6蛋白表达，结果与menon等［6］结果一致。本研究还发现，在侵入绒毛膜的炎性细胞浆中，il-六种蛋白质的表现更为明显，说明这些炎性细胞侵入绒毛膜羊膜，也是il-6的主要来源。在我们看来，早产的发生可能是由于羊膜绒毛膜组织中侵入的大量炎性细胞增加了il-6，而il-6可以合成和分泌羊膜和绒毛膜的前列腺素［7］，导致子宫收缩和早产。此外，这些炎性细胞释放溶酶体酶，使胎膜组织变性、坏死、张力下降，导致胎膜早破和早产。